Physique
chimie, la fluorescence au service du diagnostic m�dical.
E3C : enseignement de sp�cialit� premi�re g�n�rale.
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d’int�r�ts.
I. Origine physique du ph�nom�ne de fluorescence.
On donne le diagramme simplifi� de la voie de d�sexcitation d'une
mol�cule fluorescente apr�s absorption d'un photon du niveau
fondamental au deuxi�me niveau d'�nergie �lectronique. La d�secitation
comporte deux phases :
processus de conversion interne : la mol�cule passe d'un niveau excit�
sup�rieur � in niveau excit� interm�diaire inf�rieur. Il n'y a pas
d'�mission de photons ; il peut y avoir des transferts thermiques.
La fluorescence, retour � l'�tat fondamental avec �mission de photon.

1 et 2 Quelle est l'origine de la couleur bleue fluorescente de la solution de quinine ?
La solution absorbe de la lumi�re dans l'ultraviolet. La longueur
d'onde de la lumi�re �mise par cette solution est sup�rieure � celle du
rayonnement incident, cause de cette �mission ( "loi de Stokes").
3.
Proposer une explication, s'appuyant sur des calculs, permettant de
justifier que les transitions repr�sent�es sur le diagramme sont en
accord avec la "loi de Stokes".
Longueur d'onde de la lumi�re incidente : h c / DE avec DE = 7,5-1,2 = 6,3 eV soit 6,3 x1,6 10-19 =1,008 10-18 J.
l = 6,63 10-34 x 3 108 / (1,008 10-18) =1,97 10-7 m = 197 nm ( U.V)
Longueur d'onde de la lumi�re �mise par fluorescence : h c / DE avec DE = 7,5-4,7 = 2,8 eV soit 2,8 x1,6 10-19 =4,48 10-19 J.
l = 6,63 10-34 x 3 108 / (4,48 10-19) =4,44 10-7 m = 444 nm ( bleu, domaine visible)
II. Principe de la photographie r�alis�e lors de l'angiographie r�tinienne. L’appareil photographique utilis� pour l’angiographie peut �tre mod�lis� par :
une lentille convergente de centre O, correspondant � l’objectif. Sa distance focale image est �gale � O�F’ = f ’ = 60 mm ;
- un �cran correspondant au capteur num�rique de l’appareil photographique.

On suppose par la suite que l’objectif de l’appareil photographique est proche de l’oeil au cours de cette analyse m�dicale.
4. La t�che blanche
pr�sente sur la r�tine est repr�sent�e par le segment AB. Son image sur
l’�cran est not�e A’B’. Sachant que le grandissement de l’objectif de
l’appareil photographique utilis� vaut g =A'B' / A'B= -1, donner les caract�ristiques de l’image de
la t�che blanche form�e sur le capteur num�rique dans l’hypoth�se o� A�B > 0.
L'image est r�elle, invers�e par rapport � l'objet.
5. Exprimer, en fonction de f ‘ et g , la distance O�A' pour laquelle l’image de la t�che blanche est
nette sur le capteur de l’appareil photographique. Donner la valeur de la distance D et commenter la valeur obtenue.

D = 0,12 m .
III. Analyse de la solution de fluoresc�ine utilis�e pour l’angiographie.
La solution de fluoresc�ine utilis�e lors de l’angiographie r�tinienne doit avoir les caract�ristiques suivantes :
- fluoresc�ine sodique : 10,00 g pour 100 mL de solution injectable ;
- une ampoule de 5 mL contient 0,5 g de fluoresc�ine sodique.
http://agence-prd.ansm.sante.fr/php/ecodex/rcp/R0287916.htm
On souhaite v�rifier la concentration en fluoresc�ine d’une solution
commerciale afin de s’assurer qu’elle puisse �tre utilis�e lors d’une
angiographie r�tinienne.
Donn�es :
- Formule brute de la fluoresc�ine : C20H1205 ;
- Spectres d’absorption et de fluorescence de la fluoresc�ine :

6. Les spectres
d’absorption et de fluorescence de la fluoresc�ine sont- ils en accords
avec la loi de Stokes ? Justifier votre r�ponse.
Oui : la longueur
d'onde de la lumi�re �mise par cette solution est sup�rieure � celle du
rayonnement incident, cause de cette �mission ( "loi de Stokes").
|
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our
d�terminer la concentration en quantit� de mati�re en fluoresc�ine de
la solution commerciale, l’absorbance de plusieurs solutions de
fluoresc�ine de concentrations en quantit� de mati�re connues a �t�
mesur�e.
Les mesures ont permis d’obtenir les r�sultats suivants :
C �mol / L
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1,5
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3,0
|
4,5
|
6,0
|
7,5
|
9,0
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absorbance A
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0,10
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0,21
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0,31
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0,64
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0,80
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0,96
|
La courbe d’�talonnage repr�sentant l’�volution de l’absorbance en
fonction de la concentration en quantit� de mati�re en fluoresc�ine est
reproduite ci-dessous.

7. � quelle longueur d’onde doit-on se placer afin de r�aliser les mesures d�crites ? Justifier votre r�ponse.
Pour une meilleure pr�cision, on se place au maximum d'absorption de la fluoresc�ine soit 487 nm.
Afin d’analyser la solution commerciale, il faut la diluer. On pr�pare ainsi une solution S1 en diluant 30 000 fois la solution commerciale.
8. La valeur de l’absorbance de la solution S1
mesur�e �tant de 0,67, d�terminer la concentration en quantit� de
mati�re C de fluoresc�ine, contenue dans la solution commerciale.
A = 0,07 C =0,67 ; C = 9,57 �mol /L.
Tenir compte de la dilution : 9,57 10-6 x 30000 =0,287 ~0,29 mol / L.
9. L’incertitude-type sur la valeur de C est estim�e � ΔC = 0,02 mol.L-1 dans les conditions de
l’exp�rience. Comparer la valeur exp�rimentale obtenue � la valeur retenue pour les angiographies r�tiniennes. Conclure
0,267 < C < 0,307 mol / L.
Une ampoule de 5 mL contient 0,5 g de fluoresc�ine sodique.
M(C20H1205 ) = 20 x12 +12 +5 x16 = 332 g / mol.
Quantit� de mati�re de fluoresc�ine : 0,5 / 332=1,51 10-3 mol.
C =1,51 10-3 / (5,0 10-3) ~ 0,30 mol /L.
La valeur exp�rimentale obtenue et la valeur retenue pour les angiographies r�tiniennes sont en accord.
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